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为了测试抗生素的抗性,培养器中划线培养各种细菌,上面放置着浸泡各种不同抗生素的培养片。易感染细菌无法在培养片附近生长,因此培养片周围就形成了一个明显的空白区域,但是表达MarA47YP的大肠埃希氏菌和鼠疫耶尔森菌却不受抗生素的影响,仍然能够在培养片上生长。表达YPO1737的细菌没有形成对抗生素的抗性,这表明,虽然大小不同,但是MarA47YP最有可能是鼠疫耶尔森菌中的marA基因。通过过度表达某一单个基因,鼠疫耶尔森菌被培养出来,这个菌种对四环素、利福平、氯霉素、强力霉素、萘啶酸和诺氟沙星都具有抗性。
MarA47YP能够导致类似于MarA的抗生素抗体,但是,为了确认其作用机制相同,通过实时PCR (RT-PCR)对转录进行了分析。当MarA47YP在鼠疫耶尔森菌中过度表达时,外排泵的转录也会增加,这表明,这是一种守 |
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| 恒的抗体机制。此外还开展了进一步的实验,在较低浓度的四环素环境中培养鼠疫耶尔森菌,以诱使自发变异的发生,从而导致细菌产生抗药性。对抗性突变体的分析显示,5次变异中有4次导致MarA过度表达,而且这是细菌获取抗药性的一种常见机制。 |
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